徕卡显微镜构造示意图（徕卡显微镜的基本原理与制备过程案例分析）

在徕卡显微镜中待观察样品被制成薄膜状，利用入射电子束与它作用后的透射电子作为信号，依靠电子透镜将其聚焦成像，并经多级放大，最后在荧光显微镜或照相底片上给出所要的图像。

但是必须指出徕卡显微镜成像所利用的是，三者中与样品性状关系最密切的透射式弹性散射电子。因为研究表明重元素对电子的弹性散射几率大，而且这类电子大多数分布在大散射角处.此外，样品厚度越大者，这种散射也越多。如果样品是晶体，即其原子排列整齐并有一定周期性，那么它与电子起作用的不只是一个个孤立的原子，而要考虑晶体的整个周期势场的作用。作用后的弹性散射电子更有一些特征，它们能形成反映样品结构特点的衍射图。总之，徕卡显微镜的基本原理无非是如何控制并利用这三类透射电子，尤其是其中的弹性散射电子。

如果在徕卡显微镜的主机上再配备其他一些附件，如x射线能谱仪，电子能量损失谱仪等，有针对性地检测电子与样品作用后产生的其他信号。那么，我们在观察样品形态、结构的同时，还可进行其他多种分析。这就是当代电镜的另一个重要分支方向—分析电镜(AEM)。

迄今为止，徕卡显微镜大量的电镜原位杂交工作是在整装样品(WholeMount SPecimen)上进行的，徕卡显微镜此法适用于研究染色体上的特定核苷酸序列。这里，徕卡显微镜以培养细胞为例，着重介绍一下这种样品的制备过程。

1、用Coleemid(50~song/ml)或noc及azole(10ong/rnI)处理对数生长的细胞6~18小时，使停止在分裂中期。

2、徕卡显微镜轻轻振荡培养瓶，徕卡显微镜令细胞从培养瓶壁脱落，离心(740xg)收集细胞.重悬于原体积五分之一到十分之一的培养液中，使细胞浓度为IX105细胞/ml。

文章来源：http://www.13910820560.com/，转载请注明！